Tüm iLive içeriği tıbbi olarak incelenir veya mümkün olduğu kadar gerçek doğruluğu sağlamak için kontrol edilir.
Sıkı kaynak bulma kurallarımız var ve yalnızca saygın medya sitelerine, akademik araştırma kurumlarına ve mümkün olduğunda tıbbi olarak meslektaş gözden geçirme çalışmalarına bağlanıyoruz. Parantez içindeki sayıların ([1], [2], vb.) Bu çalışmalara tıklanabilir bağlantılar olduğunu unutmayın.
İçeriğimizin herhangi birinin yanlış, güncel değil veya başka türlü sorgulanabilir olduğunu düşünüyorsanız, lütfen onu seçin ve Ctrl + Enter tuşlarına basın.
Bulaşıcı hastalıkların teşhisinde polimeraz zincir reaksiyonu (PCR)
Makalenin tıp uzmanı
Son inceleme: 05.07.2025
PCR, DNA polimeraz enzimi kullanılarak bakteri veya virüslerin genomunun (DNA) tespit edilen bölümünün kopya sayısının milyonlarca kat artırılmasına olanak tanıyan DNA teşhis yöntemlerinden biridir. Belirli bir genoma özgü nükleik asitin test edilen bölümü birçok kez çoğaltılır (çoğaltılır) ve bu da tanımlanmasına olanak tanır. İlk olarak, bakteri veya virüslerin DNA molekülü ısıtılarak iki zincire bölünür, daha sonra sentezlenen DNA primerlerinin varlığında (nükleotid dizisi belirlenen genoma özgüdür), DNA'nın tamamlayıcı bölümlerine bağlanır ve termostabil DNA polimeraz varlığında her primerden sonra ikinci nükleik asit zinciri sentezlenir. İki DNA molekülü elde edilir. İşlem birçok kez tekrarlanır. Tanı için bir DNA molekülü, yani bir bakteri veya virüs partikülü yeterlidir. Reaksiyona ek bir aşamanın dahil edilmesi - ters transkriptaz enzimi kullanılarak bir RNA molekülü üzerinde DNA sentezi - HCV virüsü gibi RNA virüslerinin test edilmesini mümkün kılmıştır. PCR, döngüsel olarak tekrarlanan üç aşamalı bir işlemdir: denatürasyon, primer tavlama, DNA sentezi (polimerizasyon). Sentezlenen DNA miktarı ELISA veya elektroforez ile belirlenir.
PCR, kan serumu veya plazması, üretra kazıması, biyopsi, plevra sıvısı, beyin omurilik sıvısı vb. gibi çeşitli biyolojik materyaller kullanabilir. PCR öncelikle viral hepatit B, viral hepatit C, viral hepatit D, CMV enfeksiyonu, cinsel yolla bulaşan enfeksiyonlar (bel soğukluğu, klamidya, mikoplazma, üreaplazma enfeksiyonları), tüberküloz, HIV enfeksiyonu vb. gibi bulaşıcı hastalıkları teşhis etmek için kullanılır.
Enfeksiyon hastalıklarının tanısında PCR'ın diğer araştırma yöntemlerine göre avantajları şunlardır:
- Enfeksiyöz etken, biyopsi sırasında elde edilen materyal de dahil olmak üzere vücudun herhangi bir biyolojik ortamında tespit edilebilir;
- Bulaşıcı hastalıkların en erken evrelerinde teşhis edilmesi mümkündür;
- Araştırma sonuçlarını nicel olarak değerlendirmek mümkündür (çalışılan materyalde ne kadar virüs veya bakteri bulunduğu);
- Yöntemin duyarlılığı yüksektir; örneğin, kanda Hepatit B virüsü DNA'sının tespiti için PCR duyarlılığı 0,001 pg/ml'dir (yaklaşık 4×102 kopya /ml), dallı problar kullanılarak yapılan DNA hibridizasyon yönteminin duyarlılığı ise 2,1 pg/ml'dir (yaklaşık 7×105 kopya /ml).
[